Гепарин


                                                      -1-
                         СОВРЕМЕННЫЕ  ДАННЫЕ О ГЕПАРИНЕ  И
                                ЕГО  БИОХИМИЧЕСКИЕ  СВОЙСТВА

Гепарин - чрезвычайно  важное  соединение , синтезируемое  в организме
животных  и человека . Это биологически активное  вещество , антикоагулянт
широкого спектра  действия ,  регулятор многих биохимических  и
физиологических  процессов , протекающих в животном организме , в настоящее
 время приковывает к себе пристальное внимание биологов , физиологов ,
фармакологов и клиницистов . Весьма эффективное использование гепарина  в
клинической практике выдвигает этот препарат в число перспективных
фармакологических агентов .

                               ХИМИЧЕСКАЯ  СТРУКТУРА  ГЕПАРИНА
В исследованиях структуры  гепарина  большое  значение  имеет изучение типа
 гликозидной  связи ,  определение содержания серы и  сульфамидных
карбоксиль-  ных  и других групп , количества ветвей в молекуле , а также
выяснение  природы уроновокислого  компонента  и т.д.  Изучение
молекулярной  структуры  гепарина очень  важно , во-первых , с  точки
зрения  сопоставления  химической структуры этого  вещества и  его
антикоагулянтных  и  других физиологических  свойств , например , таких,
как способность образовывать комплексы  со  многими  веществами. Здесь
можно  указать на  большую  роль  комплексных  соединений гепарина  с рядом
 тромбогенных  белков  плазмы  крови и  некоторыми  биогенными  аминами  в
регуляции  жидкого состояния  крови . Во-вторых , детальное выяснение
структуры гепарина открывает  определенные  перспективы  на  пути
исскуственного синтеза этогонезаменимого  медикамента . По химическому
строению  гепарин  представляет  собой  высокосульфированный мукополи-
сахарид  , состоящий  из  последовательно  чередующихся  остатков    -D-
- глюкороновой  кислоты  и 2-амино-2-дезокси -  - D - глюкозы , соединенных
 связями 1—4 . Основная  связь в гепарине — это  1—6 гекзоамин . Вольфром и
соавторы (Wolfrom et al.,1966) обнаружили , что конфигурация 2-амино-2-
дезокси--D - глюкороновокислотной связи представляет собой   -D-связь.
Наряду с  этим отмечается  существование  и некоторой    - конфигурации. В
молекуле гепарина на тетрасахаратную единицу приходится по  5—6, 5
сульфатных групп . Остатки серной кислоты  присоединены  к ОН-группам
глюкозамина . Высокое содержание сульфогрупп  обусловливает  значительный
от рицательный  заряд и , следовательно , большую подвижность в
электрическом  поле . Около 10% аминогрупп  гепарина находится в свободном
состоянии . Большинство  же из них сульфатированны.
Сульфокислотные  группы, вероятно, присоединены  к  аминогруппам  с  обра-
зованием  аминосульфокислоты.
   Молекулу  гепарина  принято  рассматривать  как  протяженную, неразветв-
леннуюлинейную  структуру. Так, электронно-микроскопические  исследования
показали, что  длина  молекулы  гепарина  равна  160=40 А . Наряду  с  этим
 некоторые  авторы  высказываются  в  пользу  разветвленной  структуры.
   По  данным  Вольфрома  и  Вэнга, гидроксильная  группа  с-6  2-амино-2-
де-
зокси-D-глюкозной  единицы  гепарина  сульфатированы.  Видимо, в  указанной
 выше  единице  гепарина  существуют  две  сульфатные  группы.
Причем  остаток  D-глюкуроновой  кислоты  не  сультирован.  Денишефски  и
соавторы  считают,  что  в  гепарине  сульфатировано  по  атому  углерода
в
положении  2   1/3  глюкуроновокислотного компонента  и  большая  часть
глю-
козаминов  сульфатирована  по  атому  углерода  в  положении  6.
   До  сих  пор  окончательно  не  решен  вопрос  о  том,содержит  ли
гепарин
ацетильные  группы.  В  то  же  время  при  исследовании  бычьего, свиного
и
китового  гепарина  установлено, что  химическое  строение  и
распреднление
остатков  N-ацетилглюкозамина одинаково  во  всех  препаратах.
   Изучение  структуры  гепарина  методом  ЯМР  показало,что  гексуроновые
остатки  находятся  в  молекуле  в  конформации  С-1.
   В  содержании  и  составе  гексуроновых  кислот  в  гепаринах  и
гепарино-
вых  фракциях  различных  млекопитающих  обнаружены  значительные  раз-
личия.  D-глюкуроновая  кислота - основная  уроновая  кислота, входящая  в
состав  гепарина.  В  гепарине  также  отмечено  наличие  кетуроновой  и  L-

идуроновой  кислот  и  найдено, что  их  соотношение  равно  2,6   1. Для
ге-
парина  характерно  присутствие  относительно  большого  количества ( до
1/3)  L- идопираносилуровых  остатков.  Определение  уровня  уроновых  кис-
лот  ( идуроновой  и  D- глюкуроновой), входящих  в  различные  гепарины  и
 гепарансульфаты, показало, что  содержание  идуроновой  кислоты  не
зависит  от  источника  гепарина  или  гепарансульфатов  и  составляет
соот-
ветственно  50-90  и  30-55 %.  В  исследуемых  мукополисахаридах
увеличивалась  величина  соотношения   N-  к  О- сульфатам  по  мере
возрастания  в  них  уровня  идуроновой  кислоты.  Величины  отношений   N-
сульфата  к  глюкозамину  в  гепарине  и  гепарансульфатах  составляют  0,7-

1,0  и  0,3- 0,6.  Отношение  S- сульфата  к  глюкозамину  изменяется  в
пределах  0,9- 1,5  для  гепарина  и  0,2- 0,8  для  гепарансульфата.
Видимо,  это  свидетельствует  в  пользу  того,  что  гепарансульфаты
представляют  собой  предшественники  гепарина  при  его  биосинтезе.
   Изучение  продуктов  деградации  гепарина  под  действием  ферментов,
выделяемых  из  среды  бактерий  Flavobacterium  heparinum,  позволило  сде-

лать  вывод,  что  его  молекула  состоит  из  ряда  последовательно  распо-

ложенных  стуктурных  элементов,  которые  могут  быть  представлены  как
1 - 4  связанные  биозные  остатки  2- сульфата  4-О-( (- L-
идопираносульфу-
роновой  кислоты)  и  2-( дезокси- 2 - сульфамино-(-D- глюкопираносил-6-
сульфата).  Повторяющиеся  тетрасахаридные  единицы,  включающие  в  себя
два  уроновых  и  идуроновых  остатка,-такова  структура  молекулы  ге-
парина  по  представлениям  Хелтинг  и  Линдал.
   Данные  о  способе  связей  между  повторяющимися  единицами  гепарина
весьма  разноречивы.  По  ширине  рентгеновских  отражений  установлено,
что  молекула  гепарина  содержит  10  тетрасахаридных  поаторяющихся  еди-
ниц.
   При  выделении  гепарина  из  печени  быка  были  получены  три
фракции,  две  из  которых  гомогенны.  Биологическая  активность  этих
фракций  росла  пропорционально  молекулярному  весу.  Так,  максимальная
активность  бы-
ла  у  фракции  с  молекулярным  весом  16200,  а  минимальная - у  фракции
7600. Установлено,  что  во  фракциях  с  молекулярными  весами  16200  и
15500  белковых  примесей  больше,  чем  во  фракции  7600.  Во  всех  фрак-

циях  был  обнаружен  глюкозамин,  галактозамин,  гексуронат,  сульфат,  га-

лактоза  и  ксилоза  в  разных  количествах. Некоторые незначительные
отличия,наблюдаемые в структуре гепарина , видимо объясняются  тем , что
исследуемые препараты получены из различных тканевых  источников и мо-
гут  быть обусловлены стабильными  комплексами  гепарина с белками , а
также наличием  примесей . По разным данным , молекулярный вес гепарина
составляет от 4800 до 20000 . Метод низкого угла рассеяния Х-лучей дает
значение молекулярного веса в 12900 , что хорошо согласуется с результата-
ми , полученными с помощью равновесной седиментации и внутренней  вяз-
кости : 12500 и 12600 соответственно . Методом гельфильтрации на сефа-
дексе  G-200  показано, что молекулярные веса гепарина , полученного из
мукозы собаки и быка , а также из легких быка , равны 11000 - 12000 .
   Как  известно в ряду  моносахарид ( олигосахарид ( полисахарид ИК-
- спектры поглощения упрощаются  в  связи с перекрыванием  многих полос .
И хотя в настоящее время интерпретация ИК-спектров ВМС подобной слож-
ной  структуры крайне затруднена и точный метод анализа еще не разработан,
полученный А.М.Ульяновым и др. ИК-спектр гепарина фирмы “СПОФА” (ЧССР)
позволил идентифицировать наличие максимумов поглощения , соответствую-
щих  валентным колебаниям следующих групп : SO(N ,SO3 ,COO-, а также груп-
пировки С—С , ОН - и ряд других , присущих структуре молекулы гепарина .
    В спектре поглощения гепарина в УФ-области области слабый максимум при
267 нм . возможно это обусловлено незначительными примесями белка  или
аминокислот . Так , А.Ф.Алекперов (1972) пришел к выводу , что чистые
образцы гепарина не дают полос поглощения в УФ-области спектра . Однако
при исследовании водных  растворов ряда коммерческих препаратов гепарина
удалось выявить максимум поглощения при 258 нм . Автор отмечает ,что ука-
занную полосу поглощения дает фенилаланин . С помощью фотометрии и
хроматографии на бумаге показано , что в препаратах гепарина в небольших
количествах присутствует белок : минимум в гепарине фирм “ПОЛЬФА” и
“РИХТЕР” (0,0026 и 0,0035 г) и максимум в гепарине фирмы “СПОФА “ и Бакин-
ского завода (0,0045 и 0,006 г ). Алекперов отмечает ,что полученные данные

могут служить критерием чистоты этих препаратов .
    Седиментационный анализ гепарина дал коэффициент седиментации для
1% - ного водного раствора фирмы “СПОФА” 2,65 S.
    Описаны различия в биологической активности между L- и (- гепаринами .
Это обусловлено тем , что у L-гепарина глюкозамин присоединен L-гликозид-
ной связью , (-гепарин имеет в своем составе галактозамин , соединенный
(-гликозидной связью . (-гепарин , имеющий в своем составе более низкое
содержание серы и меньший молекулярный вес ,чем L- гепарин , обладает
и меньшей биологической активностью . По химической  структуре он предста-
вляет собой хондроитинсерную кислоту с ацилированной аминогруппой и со-
держит галактозамин  вместо глюкозамина .



             ЗАВИСИМОСТЬ МЕЖДУ СТРУКТУРОЙ ГЕПАРИНА И
                       ЕГО БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ


 Понятие биологической активности гепарина весьма широко , так как спектр
его физиологического действия очень велик . Сюда можно отнести анти
-коагулянтную активность , антилипемическое , антимитотическое влияния,
регуляторное воздействие в отношении ряда ферментативных систем и т.д.
Однако наиболее изученным и имеющим большое практическое применение
является антикоагулянтный эффект гепарина . Поэтому говоря о биологическом
действии гепарина, в основном говорят о его антикоагулянт-
ных свойствах .
    Обнаружено , что антикоагулянтная активность гепарина связана с
особенностями строения его молекулы . Так ( антикоагулянтная активность
зависит от содержания серы ( степени  сульфатированния ( количества
и расположения О - сульфатных групп ( а также от размера скелета молекулы
этого полисахарида . Активность выше в препаратах с большим  содержанием
эфиросвязанной  серы . С.В. Бычков и В.Н. Харламова (1975) показали ( что
активность фракции ( в которой на дисахаридную структурную единицу  прихо-
дится  четыре остатка  серной кислоты ( в 1,4 раза превышает активность фра-

кции гепарина с тремя остатками . Таким образом ( антикоагулянтные актив
-ность  гепарина  растет по мере увеличения содержания в молекуле остат-
ков серной кислоты. Видимо( данная активность зависит от положения остатков
серной кислоты в молекуле гепарина ( а также от длины цепи моле кулы . В
экспериментах с плазмой крови  кроликов получено ( что максималь-
ная антикоагулянтная активность гепарина проявляется  при рН плазмы
7,3—7,5 ( а минимальная при рН 6,1—6,5.
    Высказано утверждение ( что биологическая  активность гепарина опреде-
ляется степенью сульфатации ( карбоксилации ( а также размером ( формой
молекулы  и молекулярным весом .  В частности ( показано ( что
десульфирование ( происходящее в результате мягкого гидролиза ( сопро-
вождается  уменьшением биологической активности . При сильной щелочной
реакции среды гепарин разрушается ( что выражается в быстрой потере им
в первую очередь антилипемической активности . С другой стороны ( даже
низкая  кислотность вызывает потерю гепарином антикоагулянтной активности.
 Причем степень этой потери прямо пропорциональна степени появления  в
молекуле гепарина свободных аминогрупп . Полная  инактивация происходит
когда более половины азота присутствуют в форме свободных NH2 - групп .
Под действием горячей уксусной кислоты  гепарин теряет значительную  часть
антикоагулянтной активности при одновременном сохранении молекулярного
веса и содержания  глюкозамина . При  этом наблюдается увеличение кон-
станты  седиментации  и  степени полидисперсности параллельно с умень-
шением  фрикционного соотношения . Предполагается  ( что аминный  азот (
который первым отщепляется  в процессе рекристаллизации гепарина после
его обработки кислотой ( играет важную роль  в  проявлении
антикоагулянтной
активности . При рН среды 1—2 и 25(  в течение 25 часов изменения биоло-
гической  активности гепарина не происходит . Изменение  активности наб-
людается  после  воздействия  в  течение  60  часов  рН 4,4 и 23( . Видимо
под  влиянием  кислоты  в  молекуле гепарина  образуются  внутренние эфиры
(  что  объясняет  наблюдаемые изменения молекулярного веса ( внутренней
вязкости  и  состава  молекулы .
     Многочасовое  воздействие  на  бычий  (- и (- гепарин 40%-ной
уксусной
кислотой  при  37( сопровождалось потерей  этими  веществами  7—8%  суль-
фатных  групп и  почти  100%  антикоагулянтных  свойств .
      Гепарин  не  изменяет  своих  нативных  свойств ( в  частности
антикоагу-
лянтной  активности ( в  процессе  обработки  его  паром  при  100(  в
течение
часа  при  рН  7 . Следовательно ( гепарин  можно  стерилизовать .
      Отмечена  корреляция  между  антикоагулянтной  активностью  фракций
гепарина  и  его  молекулярным  весом . Так  даже  при  незначительном
уров- не  сульфата  (2,0 — 2,8 сульфатных  групп  на  остаток  глюкозы) у
препара-
тов  гепарина  с  низким  молекулярным  весом  (степень полимеризации равна
9) отмечалась  слабая  активность . Интересно ( что сульфатированные  дек-
страны  с  высоким  молекулярным  весом  также  проявляют  весьма  высокую
антикоагулянтную  активность . Активность низкомолекулярных  фракций  гепа-
рина  мала . Антикоагулянтная  активность  гепарина  с  молекулярным  весом
от 2500  до  15500  увеличивается  по  мере  возрастания  молекулярного
веса
до  10000 ( но  дальнейшее  возрастание  не  вызывает  заметных  сдвигов .
Уменьшение  молекулярного  веса  гепарина  при  гидролизе  в  большей  мере
обусловлено  степенью  десульфатации  молекулы ( чем  ее деполимеризации.
    При  частичном  гидролизе  отмечено  также  падение  молекулярного
веса
и  соотношения  осей  молекулы  гепарина (  а  также  снижение  вязкости  в

воде . С  помощью  дисперсии  оптического  вращения  показано ( что  N -
- десульфатация  гепарина  не  изменяет  его  естественной  структуры ( но
полная  десульфатация  вызывает  исчезновение  нативной  конформации .
(-облучение  вызывало  деполимеризацию  гепарина ( но  десульфатация  при
этом  не  наблюдалась .  Воздействие  УФ - излучения  снижало  антикоагулян-

тную  активность  и  уменьшало  потенциальную  возможность  связывания их
катионных  красителей .  Поток  же  электронов  обусловливал  деполиремиза-
цию  гепарина .
     Действие  гепарина ( ингибитора  практически  всех  фаз  процесса
сверты-
вания  крови ( проявляется  при  наличии  и  участии  кофактора  гепарина (
присутствующего  в  плазме  крови .  Кофактор  гепарина ( возможно (
предста- вляет  собой  одну  из  фракций  сывороточного  альбумина .



Прежде  всего  необходимо  подчеркнуть ( что  в  настоящий  момент  нет
пол-
ной  ясности  относительно  механизмов  биосинтеза  гепарина  .  Исходные
вещества  необходимые  организму  для  образования  гепарина ( - глюкоза  и
неорганический  фосфат .  Сульфатация  происходит  в  тучных  клетках
сразуже  вслед  за  полимеризацией . Напротив ( Райс  и  соавторы (Rice  et
al.(1967)
считают (  что  перенос  сульфата  происходит  на  низкомолекулярные  пред-
шественники .  Предполагают  также ( что  способность  управлять  переходом
сульфата  в  N - десульфированный  гепарин  проявляет  микросомальная
фракция  из  гомогената  мастоцитов  опухоли  и  что  свободные
аминогруппы
необходимы  для  энзиматической  N - сульфатации  гликозаминогликанов
     На  основании  экспериментов  (  проводимых  на  ткани  мастоцитомы
мы - ши ( по  изучению  биосинтеза  специфического  остатка  глюкуроновой
кис- лоты  была  предложена  схема  реакций  биосинтеза  в  области  связи
ге-
парин - полипептид . Высказано  предположение ( что  в  процессе  синтеза
происходит  ряд  специфических  гликозилтрансферазных  реакций . При  этом
продукт  каждого  предыдущего  этапа  служит  субстратом  для  следующей
реакции .  Для  каждой  реакции  переноса  необходим  отдельный  фермент .
наличие  одного  из  таких  ферментов - глюкуронозилтрансферазы обнаруже-
но  в  мембране  тучных  клеток .
     Вопрос  о  точной  локализации  структур ( связанных  с  биосинтезом
гепарина ( до  сих  пор  не  решен . Однако  есть  многочисленные  указания
на  то ( что  непосредственное  отношение  к  синтезу  имеют  тучные
клетки
соединительной  ткани ( а  также  генетически  родственные  и  функциональ-
но  близкие  им  базофильные  клетки  крови ( в  связи  с  чем  и  те  и
другие
получили  название  “гепариноциты”. Доказано  ( что  содержащие  гепарин
гранулы  тучных  клеток  выделяют  это  вещество  в  межклетники   и   кровь
.
Также  базофилы  служат  источником  гепарина ( выделяя  в  плазму  крови
небольшие  порции   этого   антикоагулянта  .  Но   отмечая   несоответствие
между  общим  количеством  гепарина  в  организме  и  его  содержанием  в
тучных   клетках  (  предполагает   возможность   существования   и   других
источ-
ников  гепарина .
     Известно ( что  тучные  клетки ( имеющиеся  в   организме   не   только
выс-
ших  животных  (  но   и   морских   звезд  (  моллюсков  (  ракообразных  и
представляющие  собой  обязательную  часть  соединительной  ткани ( разви-
ваются  из  тканей  мезенхимы .  Предшественниками  тучных  клеток  являют-
ся ( очевидно ( промакрофоги  моноцитарного  происхождения . Вероятно ( кле-

точные  элементы  крови  моноцитарного  ряда ( проникая  в  межклетники сое-

динительной  ткани ( дают   начало   тучным   клеткам  .  Как   считается  (
молодые
тучные  клетки  берут  свое  происхождение  от  клеток ( подобных  средним
лимфоцитам . последние  также  активно   синтезируют    гепарин   и   другие
су-
льфатированные  мукополисахариды .
     Основанием для утверждения о непосредственном отношении тучных   клеток
 к  процессу  свертывания  крови  послужило  их  расположение  вблизи
кровеносных  сосудов (  а   также   то  (  что   они   являются   носителями
гепарина.
До  90%  всей  массы  тучных  клеток  приходится  на  заполняющие  цитоплаз-

му  базофильные  метахроматические  гранулы  диаметром  0(3 - 1(0 мк . На
1 мг тучных  клеток  крысы  приходится  316 международных  единиц гепарина(
который  весьма   прочно   связан   с  гранулами  (  так   что   его   можно
выделить
лишь  после  их  разрушения .  Наряду  с  этим  имеются  указания на   то  (
что
гепарин находится  в  цитоплазме  в  свободном  состоянии .
    В  пользу  того ( что  гепарин   синтезируется   в   тучных   клетках  (
говорит  факт   обнаружения   в   них  ряда   ферментов   (   обеспечиваюших
образование
сульфатированных  мукополисахаридов .  Весьма  важным  доказательством
служит  и  то  (  что   меченые   предшественники   включаются   в   гепарин
гранул
тучных  клеток ( сам  же   предварительно   меченый   гепарин   в   них   не
обна-
руживается .  Кроме  гепарина  в  гранулах  тучных   клеток   разных   видов
мле-
копитающих  содержатся  нейтральные  мукополисахариды ( гепарин - моно-
сульфат .   Основу   гранул   представляет   комплекс   белок  -  гепарин  .
Гепарин
существует  преимущественно  в  жесткой  валентной  комбинации  с  белками
и   практически   не   обнаруживается    в    заметных    количествах    как
экстрацел-
лулярный  компонент  соединительной  ткани . Прочная  связь  гепарина и бел-

ка   при   этом   обусловлена   соединением   сульфатных   и   карбоксильных
групп
полисахарида  с  NH-группами  аргинина  белка . Менее  прочно  с  этим  ком-

плексом  посредством  свободных  СОО - групп  белка  связан  гистамин.
        Относительно  происхождения  гранул  тучных   клеток   существует  и
такая
точка  зрения ( согласно  которой  они  являются  производными  аппарата Го-

льджи . С другой  стороны  считается ( что  они  представляют  собой  специ-

фические  структуры ( дифференцировавшиеся  из  митохондрий .
        Гепарин  содержится   во   всех   тканях   млекопитающих  (  имеющих
клеточные   элементы  :  в   печени  (  легких  (  селезенке  (  в   стенках
кровеносных
сосудов ( в  пищеварительном  тракте ( коже  и  др.  Есть  он  и  в   муцине
сви-
ньи ( в  крови  (  печени   и   мышцах   рыб  (  в   тканях   ряда   морских
моллюсков .
Наиболее  богаты  гепарином  легкие  и  печень  млекопитающих . Гепарин
обнаружен  также  в  потовой  жидкости .  Важнейшим  источником  для  полу-
чения  гепарина  в  фармакологических   целях   является   ткань  легких   и
капсу-
ла  печени  быка . Гепарин   обнаружен   в   эритроцитах   и   лейкоцитах  .
Около
90% гепарина крови  связано  с форменными элементами . Известно большое
количество  других  источников  гепарина   и   гепариноподобных   веществ  .
Так
ткани  многих  морских  животных  содержат  вешества  с  высокой  антикоагу-

лянтной  активностью . Гепарин  также  выделен  из  кожи  крыс.  Показано  (
что  выделенное  вещество  представляет  собой  высокомолекулярное  сое-
динение  с  разветвленной  структурой ( а  не  агрегат  низкомолекулярных  .
Его  молекулярный  вес  1100000 ( а  коэффициент  седиментации  12(8 S .
    Препарат гепарина  в 16  раз  более  вязок  ( чем   гепарин   из  муцина
свиньи
Китовый   гепарин  ((-гепарин)  впервые   был   выделен    из    легких    и
кишечника
кита - полосатика . Отличительная  особенность  его  структуры  заключается
в   том   (  что   он   содержит   N  -  ацетилглюкозамин  (   к    которому
присоединены другие  группы  гепарина  .  Молекулярный   вес  (  -  гепарина
близок  к  весу   гепарина   полученного   из   тканей   крупного   рогатого
скота .

                 ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ  СВОЙСТВА  ГЕПАРИНА
     Препараты ( пути  введения ( разрушения . Получают  гепарин  из  легких
крупного  рогатого  скота .  Для  медицинского  применения   выпускается   в
виде  натриевой  соли - аморфного  белого порошка ( рас-
творимого  в  воде  и  изотоническом  растворе  натрия  хлорида ; рН  1%
раствора  6(0 - 7(5 .
      Активность  гепарина  определяется  биологическим  методом  -
- по  способности  задерживать  свертывание  крови  и  выражается  в
единицах  действия  ( ЕД ) ; 1  мг  международного  стандарта  гепарина
содержит  130 ЕД ( 1  ЕД = 0(0077 мг ).  Практически  препарат  выпус-
кается  с  активностью  не  менее  110 ЕД  в 1 мг . Для  инъекций  выпус-
кается  раствор  гепарина  по  5000 ( 10000  и  20000 ЕД  в  1 мл .
     За  рубежом  выпускается  также  йодогепаринат  натрия  ( гепари -
нат (  другие  препараты  гепарина  пролонгированного  действия .
     Вводится  гепарин  внутривенно ( внутримышечно ( подкожно ( в ви-
де  аэрозоля  ингаляционно ( субвагинально .
     В  настоящее  время  получены  гепариноподобные  соединения (
так  называемые  гепариноиды . К  этой  группе  относится  отечествен -
ный  препарат  синантрин - С ( полученный  из  целлюлозы . Он  удержи-
вается  в  крови  дольше ( чем  гепарин ( поэтому  его  вводят  в  меньших
дозах . Выпускается  в  ампулах  по  5 мл (3200 ЕД) . Вводят  препарат  в
острых  случаях  внутривенно  и  внутримышечно  по  2 мл через  каждые
6 ч. ( а  в  тяжелых  случаях - по  4 мл каждые  4 ч. Длительность  приме-
нения  такая  же (  как  гепарина.
    За  рубежом  испытан  с  благоприятным  эффектом  в  эксперименте
и клинике  гепариноид G 31150 . К  гепариноидам  относятся  кроме  того(
ликвемин ( ликвоид ( декстрасульфат ( атероид ( гемоклар ( декстранин(
перитол ( требурон ( тромбостоп ( элепарон  и  др.
     Однако  большинство  указанных  препаратов  все  еще  изучаются  и
пока  не  получили  более  или  менее  широкого  распространения  в кли-
нической  практике ( где  по  прежнему  предпочтение отдается  гепарину.
     Гепарин  входит  в  состав  тромболитина ( содержащего  трипсин  и
гепарин  в  соотношении  6 :1 . Препарат  обладает  фибринолитическими
и  антикоагулянтными  свойствами (  выпускается  во  флаконах  по 0(05
и  0(1 г. Пименяют  внутривенно  и  внутримышечно . Для  внутривенного
введения   содержимое   флакона    растворяют   в   20  мл    изотонического
раствора хлорида натрия ( для внутримышечных инъекций - в 5 -10 мл 0(5 -  2%
раствора  новокаина .  Внутривенно  вводят  медленно ( в течение 3 - 5  мин)
. Для  субвагинального  применения  выпускаются   препараты   отечественного
производства  валогеп  и  румынского  производства  —
—  гепарин-1.
   Наружно  применяют  мазь  гепариновую  следующего  состава : гепа-
рина  2500 ЕД ( анестезина  1 г. ( бензилового  эфира  никотиновой  кис-
лоты  0(02 г. ( мазевой  основы  до  25 г.
    Наиболее  постоянное  общее  действие  гепарина  как  антикоагулянта
наблюдается  при  внутривенном  введении . При  этом  эффект  наступа-
ет  уже  через  3 - 5 .
  Основным  методом  введения   гепарина   в   клинике   в  настоящее  время
является  парентеральный .
  Введенный  в  организм  гепарин  частично  разрушается  в  печени  и
почках ( частично  выделяется  в  неизмененном  виде  с  мочой .
  Период  полураспада  гепарина  зависит  от  дозы  введенного  препа-
рата : после  инъекции  3000 ЕД  он  составляет  40  минут  и  после  инъ-
екции  10000 ЕД  69 - 83  мин.



Роль гепарина  в
  гормональной
регуляции  функций



фармакологические
         свойства
         гепарина



         ЗАВИСИМОСТЬ
                МЕЖДУ
          СТРУКТУРОЙ
       ГЕПАРИНА И ЕГО
      БИОЛОГИЧЕСКОЙ
        АКТИВНОСТЬЮ



           БИОСИНТЕЗ
             ГЕПАРИНА
                 И ЕГО
             ТКАНЕВЫЕ
            ИСТОЧНИКИ



  ВЛИЯНИЕ  ГЕПАРИНА
        НА  ЧЕЛОВЕКА



         ВЛИЯНИЕ  ГЕПАРИНА  НА  ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫЙ  ТРАКТ.

   В  первые  годы  изучения  и  применения  гепарина  как  антикоагулянта(
его  связь  с  системой  пищеварения  представлялась  только  в  том  смы-
сле  ( что  этот  препарат  может  вызвать  осложнения .
   В  настоящее  время  есть  данные о  том ( что  гепарин  тормозит
желудочную  секрецию  и  обладает  противоязвенным  эффектом . Однако
и  до  настоящего  времени  некоторые   исследователи   пытаются   объяснить
его  противоязвенный  эффект  благоприятным  влиянием  на
гемодинамику .


       ВЛИЯНИЕ  ГЕПАРИНА  НА  СИСТЕМУ  КРОВЕТВОРЕНИЯ
                            И  ПЕРИФЕРИЧЕСКУЮ  КРОВЬ

Несмотря  на  некоторую  противоречивость  литературных  данных  о  вли-
янии  гепарина  на  отдельные  стороны  системы  кровотворения ( в  целом
препарат  обладает  заметным  стимулирующим  действием  на  гемопоэз.
Гепарин  уже  в  дозе  250 ед\кг  вызывал  выраженный  лейкоцитоз : у  мышей
 максимум  через  1  час ( у  крыс - через 3 часа . С  возрастанием
дозы  увеличивался  лейкоцитоз ( который  возникал  преимущественно
за  счет  лимфоцитов. Опытами  на  новорожденных  и  половозрелых  мышах   и
 крысах  установлено( что  многократное  введение  препарата
увеличивало  количество  в  тимусе  и  селезенке  стволовых  кроветворных
клеток. Представляют  интерес  исследования ( проведенные  на  кроликах(
в  ходе  которых  выяснено  (  что   гепарин   существенно   не   влиял   на
содержание  эритроцитов  и  гемоглобина ( однако  количество  ретикулоци-
тов  увеличивалось  на  15%  в  первые  часы  после  его  введения.
       Более   четко   установленым   можно    считать    факт    стимуляции
гепарином  выработки  лейкоцитов  и  их  фагоцитарной  активности . Так (
отмечено(   что    под    влиянием    гепарина    происходит     возрастание
абсолютного  числа  лимфоцитов  и  некоторое  повышение  нейтрофилов
и  базофилов ( увеличивается  число  митозов  в  лимфатических  узлах .
Имеются  наблюдения  о  том ( что  гепарин  обладал  двухфазным  дейст-
вием  на  содержание  лейкоцитов  в  крови : вначале ( после  введения
препарата ( возникали  лейкопения  и  эозинофилия.



           ГЕПАРИН  И
 СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТАЯ
             СИСТЕМА



Функционая  полноценность  сердечно-сосудистой  системы  обуслов-
лена  в  основном  3  факторами : 1) сократительной  способностью  серд-
ца ; 2) тонусом  сосудов ; 3) массой  циркулирующей  крови  и  ее  реологи-
ческими  свойствами . В  регуляции  этих  механизмов  гепарин  принимает
самое  непосредственное  участие . Он  усиливает  работу  сердца ( снижая
одновременно  тонус  сосудов  и  улучшая  реологические  свойства  крови.
   У  больных  ишемической  болезнью  сердца  после  курса  лечения  в те-
чение  14  дней  препарат  наряду  с  благоприятными  сдвигами  в  системе
свертывания  и  липидном  обмене  вызывал  улучшение  сократительной
функции  сердца . Это  происходило  за  счет  уменьшения  фазы  изомет-
рического  сокращения ( удлинения  периода  изгнания ( заметного  сниже-
ния  периферического  сопротивления .
    Гепарин  благоприятно  влияет  на  обмен  макроэргических  фосфатов
в  сердечной  мышце. Он  изменяет  соотношение  компонентов  аденило-
вой  системы  в  различных  отделах  сердца.  Наиболее   выраженный   эффект
гепарина  на  энергетический  обмен  сердца  выявлен  через  час
после  его  введения . В  нормальной  сердечной  мышце  гепарин  досто-
верно  повышает  активность  нуклеаз ( дезаминаз  глютаминовой  и  адени-
ловой  кислот ( нейтральных  протеиназ ( трансаминаз  и др.(т.е. активность
основных  энзимов  диссимилярной  фазы  азотистого  обмена.
     Однако  уровень белков  и  нуклеиновых  кислот  при  этом  не  снижает-

ся (  по   всей   вероятности  (  за   счет   одновременного   усиления   их
синтеза.
Характерна  также  тенденция  к  усилению  ресинтеза  гликогена (  повыше-
нию  липотитической  активности  миокарда (  нормализации  уровня  суль-
фгидридных  групп  и  др.
       В  условиях  гиподермии  гепарин  улучшает  сердечную  проводимость.
       Общепризнанным  считается  гипотензивное  действие  гепарин . В  ме-
ханизме  его  сосудорасширяющего  эффекта  имеет  значение  снижение
чувствительности  периферических  прекапилляров  к  действию  адренали-
на  и  норадреналина .  Существует  мнение ( что  наблюдающееся  при
возбуждении  сосудо-двигательного  центра  снижение  уровня  гепарина
способствует  повышению  чувствительности  артериальных  сосудов  к
катехоламинам . В  то  же  время  гепарин   в   дозе   400  ед\кг   при   4-
кратном
введении  у  кошек  снижает  содержание  норадреналина  в  стенках вен и
артерий . Благодаря  сосудорасширяещему  действию  гепарина  увеличи-
вается  плацентарное  кровообращение . У  больных  сахарным  диабетом
методами  реовазографии  и  капилляроскопии  установлены  улучшение
коллатерального  кровообращения ( некоторая  нормализация  тонуса
сосудов  и  проницаемости (  уменьшение  перикапиллярного  отека.
      Многообразие  путей  и  методов  введения  гепарина  базируется  на
патогенетической  основе. Гепарин ( как  и  другие  полисахариды ( облада-
ет  наиболее  выраженным  эффектом  в  местах  всасывания ( циркуляции
и  выведения ( т.е.  в  местах  наибольшей  его  концентрации . Поэтому
для  лечения  и  профилактики  тромбоэмболических  осложнений  его
целесообразнее  использовать  путем  введения  в  сосудистое  русло(
при  заболеваниях  дыхательной  системы - в  виде  ингаляций ( для  про-
филактики  спаек - внутрибрюшинно и т.д.
       Следует ( конечно (  учитывать  (  что   гепарин  (  подобно   другим
препа-
ратам ( обладает  побочным  действием . Общеизвестна  его  способность
при  передозировке  вызывать  гемморагические  явления . Кроме  того в
последнее  время  выявлено  нежелательное  свойство  гепарина  при
длительном  применении  приводить  к  развитию  остеопороза ( что  может
способствовать  возникновению  переломов  костей.



      СПИСОК  ИСПОЛЬЗОВАННОЙ  ЛИТЕРАТУРЫ

1) Д.А. Маслаков “Биологическая  активность  некоторых  полисахари-
    дов  и  их  клиническое  применение”  Минск 1977 ( 615  М314
2) А.И. Ульянов ( Л.А. Ляпина “Современные  данные  о  гепарине  и
    его  биохимических  свойствах” (  журнал  “Успехи современной био-
    логии” Т-83
3) Д.А. Фердман “Биохимия” М.( Высшая  школа 1966
4) Д.Р. Лоуренс( Н.Н.Бенитт ”Клиническая фармакология” М.(Медицина1991
5) А.И. Грицюк “Клиническое применение гепарина” Киев 1981.



                      Министерство  здравоохранения  РФ
      Ярославская  государственная  медицинская  академия
         Кафедра  биологической  и  биоорганической  химии



                     РЕФЕРАТ
         Гетерополисахариды . Гепарин .



                             Выполнил: студент 1 курса ( 13 группы
                                                                   лечебного
 факультета
                                                                        Ухов
Владислав
                                                               Руководитель:
Хохлова О.Б.



                                   Ярославль  1997
                                  Оглавление

1)  Химическая  структура  гепарина
2)  Зависимость  между  структурой  гепарина  и  его
      биологической  активностью
3)  Биосинтез  гепарина
4)  Фармакологические  свойства  гепарина
5)  Влияние  гепарина  на  человека